在最新一代的《生化危机4》中，玩家将扮演《生化危机2》的男主角里恩(leon)，里恩在本代中已成为美国政府的顶尖探员，为了执行搜索美国总统女儿的任务，深入欧洲的某个村落，遭遇到整村的狂暴村民，而陷入苦战。不同于系列作传统的2d背景3d人物表现手法，本代将采用完全3d化的方式呈现，场景的范围也扩大许多，不但视野更加广阔、行动更为灵活，游戏的进行也更加连贯，不再出现以往系列作传统的开关门读取画面。在系统方面，因应全3d化的变革，玩家角色的行动也更加的自由，并加入了新的行动按钮，除了原本以刀枪的攻击之外，还可以搭配包括跳跃、翻墙、掀梯、破窗、脚踢...等各种因应状况而生的行动，例如可以手枪射击敌人脚部，让敌人跪倒，再以脚踢的方式打败敌人，或者像是动作电影一般，施展翻墙破窗等矫健帅气的身手。系统主要由第一人称视点以及另外两种第三人称新视点所构成，游戏中将以这三种视点交替进行，游戏的操作基本上与先前《生化危机》系列相同。与以往的《生化危机》系列作传统不同，在《生化危机4》中，玩家的体力计量表与残余弹药数将会直接显示于画面上，恢复体力依旧是使用系列作中为大家所熟知的药草与急救喷雾罐，而游戏选单与以往的作品几乎是一样的。